高效液相色谱（HPLC）是以高压液相为流动相，采用柱色谱分离技术。目前液相色谱法应用已经非常广泛。气相色谱法和液相色谱法分别测定了20%和80%的已知有机物。液相色谱法和气相色谱法在基本理论上没有明显区别。它们的主要区别在于作为流动相的液体和气体的性质。
液相色谱原理
（1）液相色谱分析过程：将储液瓶中的溶剂通过泵吸入色谱系统，输出，经流量和压力测量后进入进样器。被测物由注射器注入，流动相通过色谱柱。柱上分离后，进入检测器。检测信号由数据处理设备采集处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。在复杂混合物分离（极性范围宽）的情况下，梯度控制器也可用于梯度洗脱。
（2）液相色谱分离过程：
首先，将样本添加到柱头。假设样品中含有a、B、C三种组分，它们与流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间分布。分配系数小的组分A不易被固定相截留，提前流出。组分B的分配系数在a和C之间。第二个洗脱柱。当含有一种以上组分的混合物进入体系时，混合物中的组分按两相分配系数的不同从色谱柱中流出，达到分离的目的。
色谱过程中不同组分的分离，首先取决于两相中各组分的分配系数、吸附容量和亲和力是否存在差异。这是一个热力学平衡问题，也是分离的首要条件。第二，当不同组分在柱内运动时，谱带随柱长的增加而变宽。分离与两相间的扩散系数、固定相的大小、柱的填充条件和流动相的流速有关。
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